大客車在凌晨2點-5點不能在高速公路上行駛。根據《國務院關于加強道路交通安全工作的意見》要求，要積極推行長途客運車輛凌晨2時至5時停止運行或實行接駁運輸。客運車輛夜間行駛速度不得超過日間限速的80%，并嚴禁夜間通行達不到安全通行條件的三級以下山區公路。

夜間遇暴雨、濃霧等影響安全視距的惡劣天氣時，可以采取臨時管理措施，暫停客運車輛運行。嚴格落實長途客運駕駛人停車換人、落地休息制度，確保客運駕駛人24小時累計駕駛時間原則上不超過8小時，日間連續駕駛不超過4小時，夜間連續駕駛不超過2小時，每次停車休息時間不少于20分鐘。

擴展資料：

《道路旅客運輸企業安全管理規范（試行）》第四十五條道路旅客運輸企業在安排運輸任務時應當嚴格要求客運駕駛人在24小時內累計駕駛時間不得超過8小時（特殊情況下可延長2小時，但每月延長的總時間不超過36小時），連續駕駛時間不得超過4小時，每次停車休息時間不少于20分鐘。

對于單程運行里程超過400公里（高速公路直達客運600公里）的客運車輛，企業應當配備兩名以上客運駕駛人。對于超長線路運行的客運車輛，企業要積極探索接駁運輸的方式，創造條件，保證客運駕駛人停車換人、落地休息。對于長途臥鋪客車，企業要合理安排班次，盡量減少夜間運行時間。

參考資料來源：中國政府網――國務院關于加強道路交通安全工作的意見

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